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1、 无缝克隆（Seamless Cloning/In-Fusion Cloning），区别于传统PCR产物克隆，唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基。
2、由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基，依靠碱基间作用力互补配对成环，无需酶连即可直接用于转化宿主菌。
3、进入宿主菌中的线性质粒（环状）依靠自身酶系将缺口修复。
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